贮存液配制
0.1mg FITC-Phalloidin 溶于0.5ml 无水甲醇 (或DMSO)，配成200 μg/ml 贮存液。分装冻存于-20oC，干燥、避光保存至少一年。

染色方法
1. 细胞爬片生长24-48 小时；
2. 预温PBS(37 oC)清洗细胞2 次，每次10 分钟；
3. 4%多聚甲醛室温固定5-10 分钟，PBS 清洗细胞3 次；
【备注】也可用3.7%的甲醛溶液固定，但甲醛中不能含有甲醇，因为在固定过程中甲醇可能会破坏肌动蛋白。
4. 0.1%Triton X-100/PBS 室温破膜3-5 分钟，PBS 清洗细胞3 次；
【备注】该步骤可以省略，因为Phalloidin 分子量很小，多聚甲醛固定后细胞膜产生的孔洞足以让Phalloidin 进入细胞。且经Triton 破膜后，Phalloidin 可能对细胞核有非特异性染色。
5. 5 μl FITC-Phalloidin 贮存液加入150 ul PBS 中配成工作液 (5 μg/ml )并用以染细胞，室温染色30-60 分钟；1) FITC-Phalloidin 工作浓度范围为2-50 μg/ml，一般使用浓度为5 μg/ml；2) 为降低非特异性染色，配制FITC-Phalloidin 工作液时，可在PBS 中加入1% BSA(牛血清白蛋白)。或者在染FITC-Phalloidin 前用含1% BSA 的PBS 液室温封闭细胞20-30分钟。 3)为防止染色过程中液体的蒸发，最好在密闭的湿盒内进行。
6. PBS 清洗细胞3 次；
7. 吸去多余水分，加荧光封片液（中性或偏碱性缓冲液加等量甘油）封片，荧光或共聚焦显微镜下观察。